液相色譜儀系統(tǒng)
點擊次數(shù):2380 更新時間:2018-03-27
液相色譜儀系統(tǒng)
器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為供的信號,常用器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
1.紫外見吸收器
紫外見吸收器(UVD)是HPLC中應(yīng)用zui的器之一,所有的液相色譜儀配有這種器。其點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對吸收物質(zhì)限1ng,后不破壞樣品,用于制備,并能與器串聯(lián)使用。紫外見器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似,實際上就是裝有活動地的紫外見光度計。
?。?)紫外吸收器
紫外吸收器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)出紫外-見區(qū)范圍的連續(xù)波長,并安裝一個光柵型單色器,其波長選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個流通池,一個作參比,一個作丈量用,光源發(fā)出的紫外光照到流通池上,若兩流通池通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下吸收,光電管上接受到的輻度相等,信號輸出。當(dāng)組分進(jìn)進(jìn)丈量池時,吸收的紫外光,使兩光電管接受到的輻度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
局限:活動相的選擇受到限制,即具有紫外吸收的溶劑不能做活動相,每種溶劑有截止波長,當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降10%以下,因此,紫外吸收器的工作波長不能小于溶劑的截止波長
?。?)光電二極管陣列器
也稱掃描紫外見分光器,是一種的光吸收式器。它采用光電二極管陣列作為元件,構(gòu)成多通道并行工作,同時由光柵分光,再進(jìn)到陣列式接收器上的波長的光信號,然后對二極管陣列掃描采集數(shù)據(jù),得到吸收值(A)是保存時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù),從而迅速決定具有*選擇性和靈敏度的波長。
2.熒光器(fluorescence detector,F(xiàn)D)
熒光器是一種高靈敏度、有選擇性的器,能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)通過化學(xué)衍生化天生熒光衍生物,再進(jìn)行熒光。其zui小濃度0.1ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光器的靈敏度比紫外器約高2個數(shù)目,但其線性范圍不如紫外器寬。
近年來,采用激光作為熒光器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光器地增了熒光的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和痕量分析中得到應(yīng)用。
3.示差折光器
示差折光器是一種濃度型通用器,對所有溶質(zhì)有響應(yīng),某些不能用選擇性器的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,用示差器。示差器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進(jìn)進(jìn)另一種介質(zhì)時,由于兩種物質(zhì)的折率不同就會產(chǎn)生折。只要樣品組分與活動相的折光指數(shù)不同,就被,二者相差愈大,靈敏度愈高,在濃度范圍內(nèi)器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。
4.電化學(xué)器
電化學(xué)器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導(dǎo)等器,屬選擇性器,具有電活性的化合物。目前它已在各種機(jī)和陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及藥等的測定中獲
得了的應(yīng)用。其中,電導(dǎo)器在離子色譜中應(yīng)用zui多。
電化學(xué)器的優(yōu)點是:
?、凫`敏度高,zui小檢丈量~般為ng,有目pg;
②選擇性好,測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì);
?、劬€性范圍寬,一般為4~5個數(shù)目;
?、茉O(shè)備簡單,本錢較低;
⑤易于自動操縱。
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